Đặt vấn đề: Nhiễm khuẩn bệnh viện (NKBV) là một thử thách lớn không những ở các nước đang phát triển mà còn ở hầu hết các quốc gia trên thế giới. Mục đích: Đánh giá các chủng gây bệnh trong các nhiễm khuẩn bệnh viện do vi khuẩn gram âm; đánh giá mức độ kháng thuốc của các chủng gram âm qua xác định MIC bằng E-test; xác định tỷ lệ gram âm đa kháng tiết beta-lactamase (ESBL) đối với Klebsiella và E.coli; đánh giá vấn đề đồng nhiễm và mức độ kháng thuốc của các vi khuẩn gram dương qua kháng sinh đồ thông thường. Đối tượng và phương pháp: Nghiên cứu tiến cứu, mô tả trên các bệnh phẩm lấy từ các bệnh nhân NKBV có kết quả dương tính với vi khuẩn gram âm hiếu khí ở khoa Lâm sàng tại Bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 2 đến tháng 6 năm 2006. Kết quả: Viêm phổi bệnh viện là nguyên nhân thường gặp nhất (45%), tiếp theo là nhiễm khuẩn vết mổ (21%), nhiễm trùng tiểu (13%), nhiễm trùng da (11%) và nhiễm trùng huyết 11%. Các loại vi khuẩn được phân lập nhiều nhất bao gồm Klebsiella Pneumonia & Klebsiella spp, Pseudomonas aeruginosa & Pseudomonas spp, Acinetobacter Baumani và Escherichia Coli & Escherichia spp. Phân tích nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) đối với 4 loại vi khuẩn được phân lập nhiều nhất trên cho thấy có tăng đề kháng đối với các cephalosporin thế hệ 3 và các aminoglycosid, với tỷ lệ đề kháng khoảng 30%. Số ESBL dương tính của E.coli là 9, chiếm tỷ lệ 50%; số ESBL dương tính của Klebsiella pneumonia là 8, chiếm tỷ lệ 72,7%. Kết luận: Giám sát việc sử dụng kháng sinh là cần thiết để làm giảm sự đề kháng kháng sinh.