Vật liệu; giống virut viêm não nhật bản (VNNB) NIH Nhật Bản thuần khiết dùng để sản xuất vacxin, chuột Swiss 3 – 4 tuần tuổi, môi trường Parker, các dụng cụ phòng thư nghiệm. Phương pháp: xác định LD50, định lượng PFU trong 1 ml, nghiền đồng nhất 20% trong PBS pH8. Kết quả: ba loạt thử nghiệm M42, M43, M44 đã xác định được nồng độ virut VNNB NIH khi tiêm truyền 2 lần (P2) có hiệu giá LD50 = 10-7 và PFU = 108, thì chủng P2 nhận được pha loãng 10-1 gây miễn cho chuột có hiệu quả nhất. Sau khi tiêm, chuột bắt đầu liệt vào vào giờ 64, kết thúc vào giờ 97 tập trung cao nhất từ giờ 81 đến giờ 85. Vacxin thô trước khi bất hoạt có hiệu giá LD50 = 10 -7 và PFU = 108 - 109.