Dùng enzym từ tụy tạng tươi để thủy phân thịt bò. Kết quả khả năng sinh trưởng và sự tạo thành kháng nguyên F1 của chủng EV76 khi nuôi cấy ở nhiệt độ 37 độ C/96 giờ trên môi trường Hottinger và môi trường Hottinger có bổ sung thêm các chất kích thích. Kết quả sản xuất thu sinh khối của chủng EV76 trên môi trường Hottinger có bổ sung các chất kích thích. Hiệu giá ngưng kết hồng cầu thụ động đều đạt 1.600.000. Tác giả đã sử dụng môi trường thạch được pha chế từ nước cốt Hottinger có bổ sung thêm CaCl2, Na2SO4 máu li giải hồng cầu, pepton để nuôi cấy chủng EV76. Quan sát bằng mắt, vi khuẩn mọc đều, khuẩn lạc lớn dính chặt vào mặt thạch, nước cốt sau khi gặt lắc tạo ra nhiều bột có độ nhớt cao biểu hiện sự có mặt của kháng nguyên F1.