Đặt vấn đề: Bệnh sán lá gan nhỏ do Clonorchis sinensis và Opisthorchis viverrini ký sinh ở đường mật của gan gây nên, bệnh lưu hành ở các nước Đông Á và Đông Nam Á. Mục tiêu: Đánh giá độ nhạy của cặp mồi đặc hiệu loài sử dụng gen ty thể để phân biệt Clonorchis sinensis và Opisthorchis viverrini đơn nhiễm hay đa nhiễm hay phối hợp với các loài sán khác. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: tách chiết ADN, thiết kế mồi, chạy PCR và giải trình tự sán lá gan nhỏ trưởng thành Clonorchis sinensis và sán trưởng thành Opisthorchis viverrini. Kết quả: Phản ứng PCR xảy ra với độ nhạy cao, phản ứng xảy ra rõ với nồng độ chỉ 0,78ng ADN và đã được thẩm định bằng dòng hoá và giải trình tự, thậm chí với C. sisnensis phản ứng còn xảy ra ở nồng độ thấp hơn là 0,39ng AND. PCR đa năng cùng một lúc với C.sinensis và O.viverrini có thể sử dụng để xác định loài của sán lá gan nhỏ C.sinensis và O.viverrini không những ở sán trưởng thành mà đặc biệt ở giai đoạn trứng và ấu trùng của nó. Kết luận: Kít PCR đa năng hệ gen ty thể xác định loài Clonorchis sinensis và Opisthorchis viverrini có độ nhạy cao đã được xác định. Đây là phương pháp phù hợp để xác định loài sán lá gan nhỏ trong vùng dịch tễ tồn tại 2 loài và các loài sán lá khác có trứng hay ấu trùng tương tự với sán lá gan nhỏ.