Nghiên cứu tối ưu hoá bằng phương pháp đơn hình tác giả đã tìm ra các điều kiện tối ưu hoá các phản ứng nhuộm hoá học tế bào ANAE là: nhiệt độ 37oC, pH=7,98 và thời gian:1 giờ. Đặc biệt bằng phương pháp này có thể giảm lượng cơ chất 7-8 lần so với các phương pháp khác.