Xây dựng phương pháp chẩn đoán nhanh vi khuẩn dịch hạch (Yersinia pestis) từ mẫu đất và nước nhiễm khuẩn
Tóm tắt
NC vi khuẩn dịch hạch đã vô hoạt. ADN tổng số bao gồm ADN của vi khuẩn dịch hạch được tách bằng DNeasy Kit, dùng cặp môi PLAF- PLAR (bám trên gen pla) để nhân đoạn gen pla có độ dài 480 bp. Sau khi xác định độ nhạy của phản ứng của PCR, để thực hiện mục tiêu xây dựng Kit chẩn đoán nhanh Y.Pestis, vi khuẩn được hòa trong mẫu đất và nước theo phương pháp giả nghiệm để kiểm nghiệm phản ứng PCR nhằm xây dựng kit phát hiện phân từ. Kết quả: Với ADN tổng số pha loãng, phản ứng PCR thực hiện thành công ở hàm lượng 0,6ng, tương đương với 1 vi khuẩn Y Pestis. Với vi khuẩn nguyên vẹn (không cần tách ADN tổng số), với lượng vi khuẩn pha loãng ở nồng độ từ 101 đến 102 (khoảng 100-10 vi khuẩn vẫn cho PCR đặc hiệu. Với phương pháp giả nghiệm hòa vi khuẩn vào trong mẫu đất, nước, PCR đặc hiệu vẫn thực hiện thành công ở độ pha loãng khoảng 1 ng ADN và 4 vi khuẩn làm khuôn. Như vậy, bước đầu Kit chẩn đoán phân tử vi khuẩn dịch hạch đã thử nghiệm thành công từ các loại mẫu, kể cả từ đất, nước sử dụng chỉ thị gen pla của Plasmid pPCP1.

Vị trí tài liệu

Trung tâm Tích hợp dữ liệu

CỤC CÔNG NGHỆ THÔNG TIN, BỘ Y TẾ

Ngõ 135 Núi Trúc, Ba Ðình, Hà Nội

Điện thoại: 04.3736.8315 (máy lẻ 12); Fax: 04.3736.8319

Email: hungnb.cntt@moh.gov.vn     Website: yte.gov.vn