Nghiên cứu biểu hiện proinsulin người trên vector pET 28A(+) trong tế bào escherichia coli BL21 (DE3)
Tóm tắt
Insulin là một trong những thuốc được sản xuất từ công nghệ protein tái tổ hợp. Nghiên cứu tạo được proin-sulin người sẽ là tiền đề cho việc biểu hiện insulin. Mục tiêu: Biểu hiện thành công proinsulin người sử dụng hệ vector pET 28a ở E. coli BL21 (DE3). Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Gen proinsulin người được tổng hợp bằng PCR (Polymeases Chain Reaction) với cặp mồi đặc hiệu PINS chứa vị trí nhận biết của BamH I và Xho I từ cDNA tuyến tuỵ người. Sản phẩm khuyếch đại được đưa vào vector pET 28a(+) tạo vector tái tổ hợp pET 28a-PINS. Plasmid tái tổ hợp được biến nạp vào chủng E. coli BL21 (DE3) tạo dòng tế bào pET 28a-PINS/ BL21 (DE3). Dòng tế bào này được nuôi cấy và cảm ứng biểu hiện sử dụng IPTG (1mM). Sản phẩm được phân tích và đánh giá bằng SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate - Polyacrylamide Gel Electrophoresis). Kết quả: Chúng tôi đã thiết kế thành công vector biểu hiện pET 28a-PINS và biểu hiện được proinsulin người trên tế bào E. coli BL21 (DE3). Proinsulin đã được tinh sạch sử dụng cột sắc ký Propond-Resin (Amersham). Kết luận: Proinsulin người được biểu hiện thành công trên hệ thống pET 28a-PINS/ BL21 (DE3).

Vị trí tài liệu

Trung tâm Tích hợp dữ liệu

CỤC CÔNG NGHỆ THÔNG TIN, BỘ Y TẾ

Ngõ 135 Núi Trúc, Ba Ðình, Hà Nội

Điện thoại: 04.3736.8315 (máy lẻ 12); Fax: 04.3736.8319

Email: hungnb.cntt@moh.gov.vn     Website: yte.gov.vn

Thư viện ĐH Y Hà Nội
Số 01 Tôn Thất Tùng, Đống Đa, Hà Nội
Điện thoại: 0438523798 – Fax: 04. 385 25115
Email: daihocyhn@hmu.edu.vn   Website: thuvien.hmu.edu.vn